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HLA分型

  细胞鉴定     |      2022-08-24 17:15:43
HLA分型SSO法
简介
LABType® SSO使用序列特异性的寡核苷酸探针连接到荧光染色的微珠上来检测样品DNA编码的等位基因。LABType® SSO技术只需PCR扩增靶DNA,杂交和检测在同一个反应混合物中完成,所以该方法既适于小规模又适于大规模的的HLA分型实验。相对于淋巴细胞毒试验的实验结果(1=阴性--- 8=阳性),LABType®的试验结果只有阴性和阳性两种结果,这就排除了复杂的结果分析。此外,HLA系统的交叉反应组导致血清学分型错综复杂,而PCR-SSO(聚合酶链式反应—序列特异性寡核苷酸)能区分单个核苷酸的改变。

SSO原理
LABType®在反向SSO DNA分型法中应用Luminex技术。首先,靶DNA使用组特异性引物进行PCR扩增。PCR产物是被生物素化的,可以使用R-藻红蛋白结合链霉亲和素(SAPE)进行检测。
PCR产物先被变性,然后再与包被在微珠上的DNA-探针互补杂交。流式分析仪LABScan ™100(Luminex100/200)或LABScan ™3D(Luminex®FLEXMAP 3D)检测每个微珠的荧光强度。根据反应类型与已发表HLA基因序列相关反映类型的比较来判定HLA分型结果。

产品优势
1、  拥有CE、FDA、CFDA认证;
2、  完善的客服和专业的技术支持;
3、  国内各大临床医院及血液中心稳定使用;
4、  精确,快速,高通量,经济;
5、  自动读取数据和分析结果,降低人为误差;
6、  无需电泳,避免接触有毒物质;
7、  比SSP方法DNA用量少,浓度要求低。

Luminex方法原理
流式荧光技术,又称悬浮阵列、液态芯片。经过近20多年的发展,已经成为全球科研、医药和临床机构广泛采用的的一种高通量、高速度的生物学检测方法。流式荧光有机整合了抗原抗体免疫反应、核酸多重扩增、基于微球的多指标联检、毛细管液流分析、多色激发荧光和高速数字信号处理技术,具有很高的门槛。

流式荧光联检特色的核心是把一定大小(4.5~7μm)、不同荧光染料染色的烯聚物小球(统称编码微球),共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。应用时,直接混合不同检测物的编码微球,再加入微量待检样本,在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合,在一个反应孔内即可以同时完成数十上几百种不同的生物学反应,而不相互干扰。最后用流式细胞检测类仪器进行分析,仪器通过多束激光及其被照物(生物化学标记物)的发射吸收谱、信号强度,来识别编码微球、以及定量样品中各单项指标数值(通过对各检测微球上报告分子的荧光强度读数)。

流式荧光技术相关的研究论文频频刊登在《自然》、《临床化学》、《临床与诊断免疫学》、《临床微生物》、《基因组研究》、《蛋白质组研究》、《癌症》等国际权威学术杂志上。随着更多开发及应用者的重视、硬件技术的发展和联检分析物的快速增加,其主流地位得到进一步巩固。

实验流程